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hKi-67检测：抗增殖药物筛选的新型免洗方法
96 人阅读发布时间：2025-09-18 10:15
hKi-67检测：抗增殖药物筛选的新型免洗方法
我们开发了一种基于Lumit®技术的快速、简单的免疫检测方法，用于定量人源Ki-67蛋白水平——该蛋白是细胞增殖的经典生物标志物。
Lumit® hKi-67 immunoassay能特异性识别hKi-67蛋白，在96孔或384孔板中均呈现良好的细胞数量线性相关性，并兼容贴壁和悬浮细胞模型。额外数据表明其在3D癌细胞球体中也表现优异。
通过不同作用机制药物的细胞处理实验证明，这种均相Ki-67检测法比常用的活细胞数量测定能更早、更可靠地检测抗增殖活性。该Lumit® hKi-67 immunoassay可与细胞非渗透性荧光DNA染料联用，从而有效区分不伴随或伴随细胞毒性的抗增殖活性。
目前检测Ki-67的方法（如Edu）经常需要繁琐的步骤，cck-8等检测不准确不能直接反映增殖。Promega发布的新型的基于细胞样本的、均质型检测方法—Lumit® hKi-67 Immunoassay，无需繁琐的操作步骤，完美帮助您提高细胞增殖检测效率！
Lumit® hKi-67检测优势：
● 直接反应细胞增殖：检测细胞增殖标记物Ki-67；
● 高灵敏度：生物发光法，捕捉微量细胞增殖变化；
● 高通量检测：基于多孔板的检测，仅需使用多功能读板仪即可检测；
● 操作简单快速：无需ELIAS洗涤孵育步骤，至多 2 小时可完成检测；
● 均质型检测：适用悬浮或贴壁培养的细胞样本。
01 支持多孔板格式下的hKi-67水平检测
通过Lumit® hKi-67 immunoassay，Ki-67基因敲除细胞的细胞依赖性发光信号消失，证实了该方法对hKi-67蛋白水平的特异性。该检测在96孔板和384孔板中均显示，随着接种增殖细胞数量的增加，信号呈现良好线性关系。
02 抗增殖活性的早期稳健检测
与相对活细胞数量检测相比，Lumit® hKi-67 immunoassay提供了一种更早且更稳健的抗增殖活性检测手段。
03 细胞毒性检测的简易联用方案
Lumit® hKi-67 immunoassay与细胞非渗透性荧光DNA染料（CellTox™ Green）的同孔联用方案，可区分不伴随（如帕博西尼）或伴随（如BAY-1895344）细胞杀伤的抗增殖活性。
04 3D癌细胞球体中的检测性能
随着HCT116球体（未处理）尺寸增大，Lumit® hKi-67检测信号与平行孔测得的相对活细胞数量呈正比。在3D球体中，Ki-67蛋白水平的下降能更清晰、更早地提示抗增殖活性，且其反应窗口比活细胞数量测定更宽。
05 新DNA合成测定的基准
简便、均相的Lumit® hKi-67免疫测定法可提供与劳动密集型新DNA合成测定法相似的抗增殖活性证据。
图.以96孔板形式处理的HCT116细胞（5,000个/孔），处理24小时。
06 总结
Ki-67蛋白表达是细胞增殖的公认标志物。
Lumit® hKi-67 immunoassay流程
• 快速简便（约2小时完成）
• 完全均相微孔板形式（无需转移或洗涤步骤）
• 兼容批量孔板处理（发光信号半衰期约90分钟）
稳健的检测性能
• 支持96孔板和384孔板规格
• 适用于悬浮和贴壁细胞模型
• 兼容2D和3D培养模型
• 覆盖多种抗增殖作用机制
• 可与细胞毒性检测多重联用
Lumit® hKi-67免疫测定法为灵敏检测抗增殖剂提供了一种稳健的筛查工具。