LDH-Glo™细胞毒性检测系统：少量的细胞获取更多的数据！

LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay 是一种通过对细胞膜破损释放到培养基中的乳酸脱氢酶（LDH）进行定量的生物发光、基于多孔板检测方法。

乳酸脱氢酶 (LDH) 催化乳酸氧化，同时 NAD+ 还原为 NADH。还原酶 利用 NADH 和还原酶底物生成萤光素（Luciferin），然后 luciferin 被 Ultra-Glo™ 重组萤光素酶转化，产生生物发光信号。本过程中产生的发光信号与样品中 LDH 的含量成正比。

LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay 可以用于评估多种机制导致的细胞死亡或毒性，例如：

 ADCC指抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用，用于评估抗体能否有效引导免疫效应细胞杀死靶细胞。在这一过程中，NK细胞等通过与抗体Fc片段结合，激活并攻击带有特定抗原的靶细胞。细胞膜损伤会释放乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase，LDH）到培养基中，通过LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay检测培养基中的LDH含量，就可以间接知道抗体介导的对肿瘤细胞的杀伤效果。

上图.细胞以效应细胞与靶细胞20:1的比例进行接种，并用利妥昔单抗（RTX）处理4小时或6小时。随后，取出2.5µl培养液样本，并将其稀释至47.5µl LDH储存缓冲液中。接着，加入等体积（50µl）的LDH检测试剂，在室温下孵育60分钟后记录发光值。ADCC= Effector cell + Target cell + RTX.

PROTAC为一种极具前景的靶向治疗新方法，具有诸多优势。在PROTAC药物的开发和优化过程中，LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay可以在活细胞水平药物代谢毒性等相关数据进行分析验证。

使用嵌合抗原受体（CAR）修饰的T细胞进行免疫疗法已被证明可有效治疗对化疗耐药的白血病和淋巴瘤。最近的临床研究表明，CAR-T细胞在多种B细胞肿瘤中具有出色的反应。LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay能够测定这些T细胞的细胞毒性潜能来验证这些细胞的体外活性。

以细胞代谢物为检测指标的ADCs 药物活性分析方法，检测用药物处理后代谢标志物水平的降低，降低程度与药物浓度呈正相关。LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay可定量检测细胞死亡后释放的LDH，评价药物导致的细胞死亡。

上图.LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay用于检测抗体偶联药物介导的细胞死亡，SKBR3细胞用Kadcyla® (trastuzumab emtansine) 处理。

免疫毒性评估，蛋白疗法脱靶毒性检测，药物的脱靶结合和免疫反应激活，会破坏非预期（健康）的靶细胞或组织，免疫毒性评估是对这一破坏潜力的评估。疫毒性分析需解决的两个因素：细胞因子风暴（Cytokine storm）和脱靶毒性（Off-target toxicity），其中LDH-Glo™ Cytotoxicity Assay可以用于靶细胞杀伤检测。