药物研发必备技术 | NanoBRET® TE活细胞靶标结合检测
56 人阅读发布时间:2025-11-14 16:03
【药物研发必备技术】NanoBRET® TE活细胞靶标结合检测
NanoBRET® TE 是Promega药物研发的金牌技术之一,可以在活细胞水平实时检测小分子化合物与靶蛋白之间的亲和力和占有率,还能提供化合物-靶蛋白滞留时间的信息,并可用于筛选抑制剂并比较其 IC50 值,可以说它架起了药物研发体内和体外实验差距的一座桥梁。
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细胞内靶标结合的定量分析
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细胞内化合物的选择性谱分析
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测量细胞内化合物滞留时间
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评估细胞内化合物的可用性
活细胞水平 | 定量检测
1. 基于新型Nanoluc®萤光素酶的优化BRET技术提供更高的检测窗口,更好的结果重复性和可定量检测的能力;
2. 多孔板和仅添加试剂的操作模式简便易扩展,更适合高通量筛选;
3. 为几百种重要的药物开发及靶标提供即用型产品试剂盒和应用说明指导,包括:
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蛋白降解:E3连接酶 (CRBN/VHL/MDM2/IAPs) ;
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RAS/RAF:20+KRAS/HRAS/ARAF/BRAF/CRAF/及多种热门突变体;;
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4. 为科学家提供DIY开发工具和使用指南用于特有靶标的研究。
使用 NanoLuc® 萤光素酶作为能量供体,系统中带有荧光基团 618 的 NanoBRET® tracer 可以透过细胞膜,进入细胞与 NanoLuc® - 靶点融合蛋白相互作用产生 BRET 信号,当待测药物与靶点蛋白存在相互作用时,会与 tracer 竞争结合, BRET 信号减弱。